尊龙凯时-人生就是博推出的本试剂盒仅用于科学研究,严禁用于医学诊断。人微量转铁蛋白(MTF)Elisa试剂盒的检测原理采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。该试剂盒通过将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育和彻底洗涤后,利用底物TMB显色实现检测。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸性条件下变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。最终,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样品的浓度。
样品的收集、处理及保存方法如下:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,并在操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,需在3000转离心10分钟内迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:需使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝剂。离心3000转30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:在3000转离心10分钟后去除颗粒与聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎,并在3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:如果样品在收集后未能及时检测,请按一次用量分装,置于-20℃冷冻保存,避免反复冻融。解冻时需在室温下均匀充分解冻。
操作注意事项及试剂盒组成的要求如下:标品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。试剂准备时,将20×洗涤缓冲液以1:20的比例用蒸馏水稀释,即1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。
分析结果时,需绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。
尊龙凯时-人生就是博承诺本试剂盒的高性能,但不对使用结果承担责任。