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尊龙凯时-人生就是博:革兰氏染色实验步骤简述

发布时间:2025-03-20   信息来源:尊龙凯时官方编辑

实验方法原理:本染色法作为基本的生物医学染色技术,适用于细菌标本的涂片或菌落。通过染色,细菌可被分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类,这是临床微生物学中常用的识别方法。

尊龙凯时-人生就是博:革兰氏染色实验步骤简述

实验步骤:

一、实验试剂:

1. 结晶紫溶液:

A液:结晶紫2g,95%乙醇20ml。

B液:草酸铵0.8g,蒸馏水80ml。

在使用前24小时,将A液与B液混合,过滤后存入试剂瓶中备用。

2. 碘液:

配制1g碘和2g碘化钾于300ml蒸馏水中。将碘与碘化钾研磨混合,逐渐加入蒸馏水,而后继续研磨直至完全溶解。

3. 脱色液:

使用95%乙醇作为脱色液。

4. 复染液:

A贮存液:沙黄25g,95%乙醇100ml。

B应用液:A液10ml,蒸馏水90ml。

菌片制备:

染色的第一步是制作涂片。使用接种环取菌液并点涂在载玻片上,标本可直接涂布。对于菌落涂片,应先在玻片上加1滴生理盐水,然后用接种针挑取菌落并在盐水中涂布。注意涂片时要轻柔操作,以免损坏细菌的排列或导致鞭毛脱落,从而影响实验结果的准确性。制备好的涂片需自然干燥,并通过适当的火焰固定,温度控制应避免过高,确保与手背接触时不烫手,以防细胞形态变化。

二、染色方法:

1. 将涂片经过火焰固定后,浸入结晶紫液中染色1分钟,随后用清水冲洗去除染液。

2. 加入碘液染色1分钟,再次用水洗净。

3. 使用脱色液,摇动涂片约30秒,直至无紫色脱落,之后用水冲洗。

4. 加入复染液,染色30秒,再次水洗。

5. 待干后进行显微镜观察。

以上步骤展示了生物医学领域中的基本染色方法,有助于微生物的识别和分类。通过精准操作,确保数据的准确性和重复性,为相关研究提供强有力的支持。尊龙凯时-人生就是博,致力于为客户提供广泛的生物医疗解决方案。